一种可控多级交联可注射热致相变水凝胶的制备方法及应用。通过亲核取代反应对壳聚糖进行多官能团化的活化接枝，纳米晶须的纯化、细化及功能化，壳聚糖基体与功能化纳米晶须形成一级交联网络，促进热致剂引导的二级交联网络的激活与形成，共同推进纳米晶须强化的可控多级交联可注射热致相变水凝胶的最终完成。通过改变体系中反应参数，可以调控复合凝胶的降解等各项性能。本发明制备流程简单可行性好，工艺绿色环保，制备得到的热致相变水凝胶是具有优异的生物相容性、力学性能、可注射性、体内降解性、抗菌性的可注射植入修复材料，能用于牙髓重建、软骨修复、心脏修复及抗凝血材料、药物释放载体、固定化酶载体、人工皮肤、骨填充材料、软组织填充、防粘连材料等。