一种工业齿轮箱圆锥滚子轴承的预负荷调整方法，属于齿轮箱装配技术领域。包括如下步骤：步骤1）对齿轮箱传动轴一端的圆锥滚子轴承的外圈轴向固定；步骤2）在齿轮箱与该传动轴另一端的圆锥滚子轴承之间设置预紧装置（18），预紧装置（18）上的弹性组件的端部与另一端的圆锥滚子轴承的外圈贴合；步骤3）根据圆锥滚子轴承所需要的预紧力确定弹性组件的变形量；步骤4）通过预紧装置（18）对弹性组件加载；步骤5）测量靠近预紧装置（18）的圆锥滚子轴承端面至齿轮箱对应侧的距离。本发明能够保证安装后圆锥滚子轴承维持在所需预紧力下工作，调节方便，使圆锥滚子轴承的使用寿命得到了提高，齿轮箱的可靠性也得到了保障。