本发明公开了一种鸡白痢沙门氏菌和鸡滑液囊支原体双重平板凝集抗原及其制备方法和应用，制备方法为分别将鸡白痢沙门氏菌C79‑1和鸡滑液囊支原体GX11‑T复苏传代后制成种子菌液，再接种相应培养基扩大培养，收获，分别经甲醛溶液灭活，浓缩，两种菌液按一定体积配比，加入终浓度为质量分数为3％的结晶紫溶液染色和体积分数为10％的甘油，混匀分装即得。本发明工艺方法简单合理，成本低，稳定性好，制备的双重平板凝集抗原经一次反应同时可检测两种疫病抗体，具有敏感性高，诊断快速，特异性强，凝集效果易于观察等优点，显著节约检测时间和检测费用，临床可用于鸡白痢和鸡滑液支原体两种抗体快速检测，淘汰病鸡，实现疾病净化。