具有越膜能力的、高稳定型的超氧化物歧化酶的制备方法
授权
摘要
本发明属于酶制剂的基因改造技术领域，具体涉及一种具有越膜能力的、高稳定型的超氧化物歧化酶的制备方法。本发明的方法，其特征在于，从嗜热脂肪地芽孢杆菌提取mRNA，利用反转录手段合成cDNA，设计特异性引物大量扩增其编码区，并连接到E.coli表达载体中，然后转化至工程菌BL21（DE3）中。利用点突变技术，增强超氧化物歧化酶的稳定性，并设计柔性多肽连接子GGGSGGGS，成功实现了越膜肽YGRKKRRQRRR与超氧化物歧化酶的可溶性融合表达。本发明的有益效果在于，通过本发明的方法所获得的超氧化物歧化酶，能最大程度的提高该酶的热稳定性；将HIV‑1肽段上具有越膜能力的CPP序列YGRKKRRQRRR（即Trans‑activating transcriptional activator序列）与超氧化物歧化酶偶联表达，赋予其越膜能力。
基本信息
专利标题 ：
具有越膜能力的、高稳定型的超氧化物歧化酶的制备方法
专利标题（英）：
暂无
公开（公告）号 ：
CN113430179A
申请号 ：
CN202110719256.8
公开（公告）日 ：
2021-09-24
申请日 ：
2021-06-28
授权号 ：
CN113430179B
授权日 ：
2022-05-20
发明人 ：
夏勇
申请人 ：
济宁医学院
申请人地址 ：
山东省济宁市太白湖新区荷花路133号
代理机构 ：
济南市易拓知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人 ：
江莉莉
优先权 ：
CN202110719256.8
主分类号 ：
C12N9/02
IPC分类号 ：
C12N9/02 C12N15/70
IPC结构图谱
C
C部——化学；冶金
C12
生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程
C12N
微生物或酶；其组合物；繁殖、保藏或维持微生物；变异或遗传工程；培养基。
C12N9/00
酶，如连接酶；酶原；其组合物；制备、活化、抑制、分离或纯化酶的方法
C12N9/02
氧化还原酶，如萤虫素酶
法律状态
2022-05-20 ：
授权
2021-10-15 ：
实质审查的生效
IPC(主分类) : C12N 9/02
申请日 : 20210628
申请日 : 20210628
2021-09-24 ：
公开
注：本法律状态信息仅供参考，即时准确的法律状态信息须到国家知识产权局办理专利登记簿副本。
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