紫花苜蓿CRISPR/Cas9基因组编辑系统及其应用
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摘要
本发明公开了CRISPR/Cas9基因组编辑系统在紫花苜蓿基因编辑中的应用,所述CRISPR/Cas9基因组编辑系统包括表达载体,所述表达载体可包括Cas9表达盒、sgRNA1表达盒和sgRNA2表达盒,所述Cas9表达盒表达Cas9。所述sgRNA1表达盒表达名称为sgRNA1的sgRNA,所述sgRNA2表达盒表达名称为sgRNA2的sgRNA;所述sgRNA1表达盒含有名称为MtU6‑6promoter的启动子和由所述MtU6‑6promoter驱动的sgRNA1基因,所述sgRNA2表达盒含有名称为MtU6‑5promoter的启动子和由所述MtU6‑5promoter驱动的sgRNA2基因;所述sgRNA1和所述sgRNA2可针对紫花苜蓿的同一靶标基因或不同靶标基因。本发明根据紫花苜蓿同源四倍体的特点对靶标基因设计双靶点,构建基因编辑双元载体p6401‑Target,由农杆菌介导转化紫花苜蓿获得再生植株。这种优化的基因组编辑系统大大提高了紫花苜蓿基因编辑效率,植株基因编辑效率可高达100%,单个靶点编辑效率可高达96.9%。
基本信息
专利标题 :
紫花苜蓿CRISPR/Cas9基因组编辑系统及其应用
专利标题(英):
暂无
公开(公告)号 :
CN113493803A
申请号 :
CN202110884895.X
公开(公告)日 :
2021-10-12
申请日 :
2021-08-03
授权号 :
CN113493803B
授权日 :
2022-04-19
发明人 :
王涛董江丽叶沁怡
申请人 :
中国农业大学
申请人地址 :
北京市海淀区圆明园西路2号
代理机构 :
北京纪凯知识产权代理有限公司
代理人 :
关畅
优先权 :
CN202110884895.X
主分类号 :
C12N15/82
IPC分类号 :
C12N15/82 C12N15/113 C12N15/84 C12N15/55 C12N15/29 A01H5/04 A01H5/02 A01H6/54
IPC结构图谱
C
C部——化学;冶金
C12
生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
C12N
微生物或酶;其组合物;繁殖、保藏或维持微生物;变异或遗传工程;培养基。
C12N15/00
突变或遗传工程;遗传工程涉及的DNA或RNA,载体或其分离、制备或纯化;所使用的宿主
C12N15/09
DNA重组技术
C12N15/63
使用载体引入外来遗传物质;载体;其宿主的使用;表达的调节
C12N15/79
专门适用于真核细胞宿主的载体或表达系统
C12N15/82
用于植物细胞
法律状态
2022-04-19 :
授权
2021-10-29 :
实质审查的生效
IPC(主分类) : C12N 15/82
申请日 : 20210803
申请日 : 20210803
2021-10-12 :
公开
注:本法律状态信息仅供参考,即时准确的法律状态信息须到国家知识产权局办理专利登记簿副本。
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1、
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