本发明提供了一种耐热保护剂及其作为禽用冻干疫苗稀释液的应用与新城疫耐热活疫苗及其制备方法。该疫苗的制备方法为将感染有新城疫病毒耐热疫苗株的鸡胚尿囊液用PBS液稀释,第一次加入耐热保护剂，混合液置于2～8度保存；用PBS将上述步骤得到的病毒储存液稀释，然后第二次加入耐热保护剂，充分混匀后定量分装。该疫苗具有与新城疫耐热冻干活疫苗相近的耐热、安全、有效等特点，但又无需冻干过程、减少抗原损耗、不仅节约了生产资源，也更适合大规模制备和临床使用。该耐热保护剂作为禽用冻干疫苗的稀释液使用，将其与市场上销售的其他疫苗稀释液进行热稳定性比较，本发明对疫苗的耐热保护效果及稳定性远大于其他疫苗稀释液。