本发明涉及医学检测技术领域，尤其涉及一种检测新冠病毒中和抗体的试剂盒及其制备方法。该试剂盒基于中和抗体可以阻断RBD与ACE2结合的技术原理集合磁微粒技术检测血清或血浆样本中的中和抗体。基于该试剂盒本发明提供一种全自动高通量的检测方法，该方法基于全自动免疫分析仪器平台，可实现新冠病毒中和抗体的快速、定量、高通量、自动化检测，可在临床实验室开展检测，20分钟内报告结果，每小时可检测200个样本。同时通过对试剂盒制备工艺、组分配方的优选，可实现试剂盒全液态组分、2‑8℃保存，使用极其方便，大大提高中和抗体检测效率。