本发明提供了一种盐酸氨酮戊酸有关物质的检测方法，该方法为反相高效液相色谱法，包含配制pH值为2.0±0.2的辛烷磺酸钠缓冲液，进而配制乙腈占10％～20％(v/v)的辛烷磺酸钠缓冲液‑乙腈作为流动相，再将以盐酸氨酮戊酸为主成分的待测样品，用所述流动相将其配制成浓度为10mg/ml的供试品溶液，取1ml所述供试品溶液置于20ml量瓶中，用所述流动相稀释至刻度，摇匀，再制作对照品溶液进行检测操作。本发明的盐酸氨酮戊酸有关物质的检测方法专属性好，对各有关物质的检出灵敏度高，杂质峰与主峰可实现完全分离，且所能检测出的物质种类也更多，能鉴定出盐酸氨酮戊酸在降解过程中产生的4种杂质，且其中两种是以前从未被鉴定出的新物质。