本发明公开了一种苯醚甲环唑半抗原、人工抗原、抗体及其制备方法和应用。所述苯醚甲环唑半抗原的结构式如式I所示，通过在苯醚甲环唑的三唑上连接戊酸手臂制成，该半抗原未改变苯醚甲环唑骨架结构和原有侧链，与苯醚甲环唑结构高度一致，有利于高特异性抗体的诱导。基于该半抗原制备人工抗原，再以人工抗原免疫动物制备获得针对苯醚甲环唑的高质量单克隆抗体，基于该抗体所建立的检测苯醚甲环唑的免疫分析方法，其IC₅₀为1.38ng/mL，最低检测限为0.32ng/mL，线性范围为0.49～3.90ng/mL，与其它结构与功能类似物交叉反应率均小于0.2％，特异性较高，可以有效检测食品中的苯醚甲环唑。表明本发明制备的人工抗原具有良好的免疫原性，可以用于制备苯醚甲环唑多克隆抗体、单链抗体和纳米抗体并建立相对应免疫分析法。