本发明公开了一种用于靶向治疗的光活性核酸适体偶联药物及其制备方法与用途，该偶联药物是应用核酸适体作为靶向基团，通过“点击化学”反应或羧基‑胺基缩合反应与光活性荧光小分子相结合，形成偶联药物。本发明利用核酸适体的靶向识别特异性、高稳定性和易修饰性，制备了用于靶向治疗的光活性核酸适体偶联药物，所述的偶联药物具有细胞靶向性，可在可见光下实现断裂，释放出对肿瘤具有杀伤作用的荧光分子。其具有微弱的暗细胞毒性和强的光诱导细胞毒性，应用此偶联药物，有望提高药物分子的靶向性，减少副作用，提高疗效。本发明的制备工艺简单、经济、高效，适合于大规模生产，特别适于制备光控释放的靶向给药的抗癌药物。