本发明属于生物技术领域，具体涉及细胞芯片及其用于细菌性感染的检测方法与应用，该细胞芯片包括醛基修饰的载玻片，所述载玻片表面划设至少一反应区域，所述反应区域内固定有多克隆二抗，所述多克隆二抗连接有CD64单克隆一抗，所述的用于细菌性感染检测的细胞芯片的制备方法包括步骤：定位载玻片表面的反应区域滴加按照质量比1：0.2‑4配制的多克隆二抗与CD64单克隆一抗的混合液进行孵育30‑60min，然后通过缓冲液淋洗、浸泡，最后烘干制得。本发明的目的在于提供一种成本低廉、操作简便的可用于CD64中性粒细胞绝对计数的细胞芯片，其采用高特异性、高灵敏度及可连续检测的CD64生物学标志物。