本发明公开了一种检测铜离子的可逆荧光探针及其制备方法，所述制备方法为：先基于含喹啉基团的化合物制得中间产物6‑(杂氮环丁烷)喹啉‑2‑羧酸甲酯，再将中间产物6‑(杂氮环丁烷)喹啉‑2‑羧酸甲酯与水合肼反应得到目标产物。本发明可逆荧光探针选择性高，只对铜离子响应，对其它金属离子无响应；同时对铜离子具有高的敏感性，在体外和体内均能瞬间和Cu²⁺反应，对Cu²⁺检出限低至0.101μM；另外本发明可逆荧光探针通过荧光猝灭机制检测Cu²⁺，然后在溶液中加入H₂S以增加荧光，这种带有“on‑off‑on”型荧光识别系统的探针在Cu²⁺和H₂S的实时识别过程中表现出优异的抗干扰性能，并且还显示出对活细胞中Cu²⁺和H₂S的敏感性和选择性。