本发明公开了一种用于注射填充的含有自体血清和高浓度脂肪干细胞的复合脂肪胶及其制备方法。本申请通过从自身外周血中分离提取血清、从自体脂肪组织中分离脂肪胶以及分离脂肪干细胞并进行体外扩增培养，再按比例将血清、脂肪干细胞和脂肪胶进行混合，从而得到复合脂肪胶。本申请方法避免了传统脂肪干细胞培养方法中非人源血清导致的外源性污染，同时凭借血清中的活性成分可为脂肪干细胞提供适宜生长的微环境，有利于其分化和发挥强大组织修复功能，使得复合脂肪胶具有相比玻尿酸、传统脂肪、脂肪胶填充具有更明显的抗衰效果，填充疗效更加持久。