本发明提供一种利用气溶胶发生装置进行小鼠呼吸染毒的方法，首先制备具有良好分散性的纳米粒子分散液，将其配置成不同浓度进行呼吸染毒测试以选择合适浓度在有效染毒的同时避免气溶胶喷口的堵塞，控制呼吸染毒的时间和次数，将小鼠置于密闭的染毒仓并通入气溶胶来实现无创呼吸染毒过程。本发明适用于纳米颗粒分散液在小鼠上的毒性评价，可以无创对呼吸过程中吸入纳米颗粒的过程进行模拟，其优点在于利用小鼠的自然呼吸进行染毒，避免了气管滴注染毒等方式的复杂操作，减少了人为因素，不会引起小鼠内部组织的感染，并且更符合实际情况下的暴露途径，有利于针对各种纳米颗粒进行毒性评价。