本发明提供了一种甲胎蛋白AFP检测用双酶共载纳米球及制备方法、探针、试剂盒及AFP检测方法，属于生物检测与酶负载材料领域。所述双酶共载纳米球包括：核‑壳结构磁性介孔二氧化硅纳米球，以及分布于介孔孔道中的葡萄糖氧化酶GoD和辣根过氧化物酶HRP；其中，所述核‑壳结构具有磁性内核颗粒和分布有介孔孔道的二氧化硅壳结构；所述磁性内核颗粒用于通过磁分离作用富集血清样本中的AFP；GoD和HRP用于催化底物显色。本发明通过核‑壳结构介孔纳米球提高了酶负载量，同时还通过超顺磁特性富集目标物，减少了生物样品引入的背景干扰，提高了检测的信号强度，从而提高了检测灵敏度；同时保证了检测稳定性，提高了检测准确度和精度。