胆红素的制备方法，包括以下步骤：步骤一，以动物胆汁为原料，加入抗氧化剂与其混合均匀；步骤二，用碱性溶液调节步骤一所得溶液的pH介于12.6‑13.5之间，进行水解反应；步骤三，往步骤二制得的溶液中加入盐析剂及醋酸溶液，静止沉淀24h以上，离心得沉淀物；步骤四，将步骤三制得的沉淀物进行冻干、破碎得冻干粉；步骤五，将步骤四获得冻干粉加入氢氧化钠溶液进行溶解后，加入植酸，再加入酸性溶液调节溶液pH介于6.5‑7.2之间，静置沉淀24h以上，获得胆红素，本发明通过限定胆红素的具体制备方法，对沉淀物先进行冻干，再进行溶解酸化，获得胆红素的纯度高达98.6％，大大提高了胆红素的品质，满足市场需求。