本发明公开了一种脐带血有核细胞分离装置及方法，其中装置包括第一透明板、第二透明板以及螺栓调节组件，所述第一透明板的周围开设至少两个第一螺孔，对应所述第一螺孔在所述第二透明板的周围开设数量相同的第二螺孔，通过所述螺栓调节组件与所述第一螺孔、所述第二螺孔配合调节所述第一透明板和所述第二透明板之间的间距。本发明通过第一透明板、第二透明板配合螺栓调节组件固定血袋，将整体装置进行离心，离心完成后带装置整体取出放入分浆夹中进行分离，整个过程中血袋不发生形变。