本发明涉及生物医药领域，特别涉及尿液中的CD24阳性表达细胞及其制备方法和应用；本申请从肌肉损伤患者的自身尿液中，发现并筛选出尿液来源的细胞中一类具有CD24阳性表达的细胞，该尿液细胞中CD24阳性表达的细胞能够体外诱导条件下成肌分化并与肌细胞发生融合形成融合肌小管；经过验证，将尿液细胞中CD24阳性表达细胞移植入动物体内后在肌肉损伤部位能够减轻炎症反应症状并实现肌肉再生修复，可用于制备修复肌肉损伤治疗的相关药物，由于本申请治疗用的细胞来源于患者自体，具备个体化精准治疗的特征，能够快速实现患者自体细胞治疗，避免移植的免疫排斥反应。