本发明公开了一种病理学实验用精确定位打孔装置，包括用于承载待打孔的琼脂培养基的基台、悬设在基台上方的基座、活动插设在基座上的压杆以及动作机构，压杆的底部设置有吊板。当基座悬设在基台上方时，动作机构用于阻碍压杆的运动，使压杆在基座上保持静止状态。当引导基座朝向基台运动时，动作机构用于引导两个夹板相互靠近，并同时解除对压杆的运动阻碍。将压杆、吊板、打孔管设置在位于基台上方的基座上，并在基台上设置两个夹板，通过动作机构即可在基座朝向基台运动的过程中，逐步完成对琼脂培养基的夹持固定以及逐步解除对压杆的锁紧固定，省时省力，方便快捷，以便于打孔器相对于琼脂平板的对准对正，可避免打孔管损坏琼脂平板。