本发明公开了一种电化学生物传感器、检测方法及用途。该电化学生物传感器包括芯片基板、工作电极、参比电极、辅助电极、固态电解质物质以及生物探针。通过将固态电解质物质固定在工作电极、参比电极以及辅助电极表面，使得在检测时，该固态电解质物质能溶解于液态生物样品以形成反应溶液，从而可以直接通过与生物探针进行电化学反应来实现检测，提升了待检测的生物靶标物质检测的便利性；进一步地，本发明提供的一种电化学生物传感器、检测方法及用途还通过聚苯胺将用于检测的生物活性物质固定到工作电极上，从而提升了电信号传递更快速，提升待检测的生物靶标物质的检测结果的可见性。