本发明提出一种基于乙烯基锍盐的生物大分子修饰方法，具体为：用固相合成法将多肽接在树脂上，生成乙烯基锍盐多肽树脂后，从树脂上剪切下来；与生物大分子反应，反应温度为25℃‑37℃，pH值为7‑9，反应溶剂为水、乙腈、甲醇、乙醇、异丙醇、叔丁醇、乙二醇、甘油、二甲基亚砜、N,N‑二甲基甲酰胺、或PBS溶液中的任意一种或两种，反应2‑6小时；其中，多肽含有甲硫氨酸基团，生物大分子带有巯基。本发明产率高，使用的反应底物容易获得，并且毒性较小，可以在弱碱性环境中反应，适合实验室和工业化多肽、蛋白质和核酸药物的化学修饰和改造。