本实用新型公开一种梯度洗脱的色谱分离装置，包括台架和安装架，所述台架上部从左到右依次设有原料计量泵、洗脱剂A计量泵、洗脱剂B计量泵、电机、洗脱剂C计量泵，所述台架下部设有恒温水槽，所述恒温水槽里面从左到右依次设有物料容器、洗脱剂A容器、洗脱剂B容器和洗脱剂C容器，所述的安装架上从左到右依次设有第一色谱分离柱、第二色谱分离柱、第三色谱分离柱和第四色谱分离柱，所述第一色谱分离柱、第二色谱分离柱、第三色谱分离柱和第四色谱分离柱之间设有循环连通机构。该梯度洗脱的色谱分离装置，结构设计合理，成本低，操作简便，适用于分离组分复杂且不易分离的物料。