本实用新型公开一种分室实验装置，装置本体被两组阻隔件分隔出菌根室和菌丝室，阻隔件通过定位组件固定在装置本体中，定位组件由两组相对应设置的定位夹板构成；每组定位夹板包括第一定位板和第二定位板，第一定位板的外侧面和底面分别与装置本体的侧壁面和底面固定连接，在第一定位板的内侧设有第一凹口；第二定位板可拆卸地连接在第一定位板上，在第二定位板的内侧设有第二凹口，第一凹口与第二凹口匹配对接可形成与阻隔件适配的夹持腔。在实验过程中，装置中的阻隔件能始终保持位置稳定，不会发生不必要的移动；定位组件的拆卸、组装过程都极为方便，操作人员可在短时间内进行尼龙网的快速更换，装置主体可迭代使用，经济性更强。