本实用新型公开一种单加样孔五联检免疫胶体金和荧光免疫卡盒，包括上壳体和下壳体，所述下壳体内设有样品扩散部和五个并列设置的测试槽，所述上壳体上开设有配合样品扩散部位置的加样口和配合测试槽位置的五个观察窗，本实用新型的优点在于提供了一种单加样孔五联检免疫胶体金和荧光免疫卡盒的设计，该设计只有1个加样口，每次检测只需要加入400μL左右的样本即可完成5个测试槽区域的反应，反应结束后各测试槽检测结果均一性好，这一技术方案结构简单、制作成本低、相比于现有多加样孔五联卡盒操作更方便、样本利用率更高，应用前景广阔。