本实用新型提供一种微生物挑战试验装置，包括气动系统、压力控制系统和压力容器，压力容器上旋接有不锈钢腔体盖，不锈钢腔体盖上设有进气口、出气口和排气阀门，压力容器内放置挑战容器，挑战容器为敞口容器，底部设置有不锈钢网架，用于固定待测样品；气动系统、压力控制系统、压力容器顶部的进气口通过抗压气体导管依次连接，形成通路。本实用新型可用于检测密封产品包装系统密封性，实现了微生物挑战试验的正负压调控，适用于多种挑战容器和样品，降低了物料、时间和人力成本，克服了现有技术的不足。