本发明提出了一种基于熵驱动信号放大与无标记荧光探针的阿尔茨海默病相关ApoE基因检测方法，属于生命分析技术的领域。通过磁珠表面核酸外切酶Ⅲ(EXOⅢ)介导的靶标循环和熵驱动两步信号放大，并以无标记的银纳米簇荧光探针为信号输出方式实现了对ApoE基因的检测。靶标基因与磁珠表面的识别双链探针特异性结合，形成EXOⅢ的酶切位点；在EXOⅢ作用下，产生大量激活链；磁珠分离提取上清液，已存在的激活链触发银纳米簇形成的三链复合物模板，产生链的分支迁移和链取代，使得银纳米簇结构产生改变，荧光信号下降。本发明具有免标记、成本低的优点，能够实现对ApoE基因的灵敏检测。