本发明涉及一种蒙古蒿中的倍半萜类化合物及制备方法和用途，该化合物为蒙古蒿内酯A，蒙古蒿内酯C,蒙古蒿内酯G,以及一个已知的倍半萜化合物贝斯特烯内酯‑b，采用将蒙古蒿全草95%乙醇渗漉得到总提取物，用石油醚、乙酸乙酯依次萃取后，取乙酸乙酯萃取物用石油醚/乙酸乙酯，乙酸乙酯/甲醇，二氯甲烷/甲醇分别梯度洗脱，再用半制备高效液相色谱仪反复进行纯化，经过波谱和质谱数据分析表明从蒙古蒿全草中分离得到三个新的降倍半萜类化合物蒙古蒿内酯A,C,G，以及一个已知的倍半萜化合物贝斯特烯内酯‑b。经体外抗肿瘤活性研究表明，所提供的化合物贝斯特烯内酯‑b对人套细胞淋巴瘤细胞具有较明显的细胞毒活性，可应用于天然的低毒抗肿瘤药物，从而为研制抗肿瘤药物提供了新的先导化合物。