本发明提供了一种用于检测β‑淀粉样蛋白(Aβ)的荧光生物传感器及其制备方法和检测方法，属于生物传感器技术领域。本发明以黑磷纳米片作为检测β‑淀粉样蛋白的荧光纳米开关，能吸附荧光探针，使所述荧光探针的荧光猝灭；当用于检测β‑淀粉样蛋白时，目标检测物Aβ与荧光探针结合，并与荧光纳米开关解吸附，荧光探针恢复荧光强度。在荧光纳米开关的调控下，所述荧光探针的荧光恢复强度与Aβ浓度呈线性关系，能够定量检测待测样品中的Aβ含量。本发明提供的荧光生物传感器以黑磷纳米片作为荧光纳米开关，可以有效的与Aβ抗体蛋白结合抑制其水解产生干扰物，增强荧光生物传感器的抗干扰能力与减少假阳性结果的发生，从而提高检测的准确性。