本发明公开了一种用于检测腺苷脱氨酶活性的组合物及试剂盒。所述组合物含有组分1和组分2，所述组分1含有缓冲液1、稳定剂1、抗坏血酸氧化酶、嘌呤核苷磷酸化酶、次黄嘌呤氧化酶、过氧化物酶和超氧化物歧化酶；所述组分2含有缓冲液2、稳定剂2、色原、腺苷、表面活性剂所述色原为N‑乙基‑N‑(2‑羟基‑3‑磺丙基)‑3‑甲基苯胺钠盐、N‑乙基‑N‑(2‑羟基‑3‑磺丙基)‑3,5‑二甲基苯胺钠盐和/或DA‑67中的一种。本发明的试剂盒含有彼此独立的组合物1、组合物2，在现有方法的基础上，通过在腺苷脱氨酶检测试剂盒中添加超氧化物歧化酶，在原有反应的基础上进一步增加催化反应，并添加新型色原DA‑67，显著提高检测腺苷脱氨酶活性的灵敏度。本发明的试剂盒具有灵敏度高、准确性好、操作便捷的优点，可用于大范围群体样本的检测。