本发明公开一种造影剂制备方法、造影剂及其应用，目的为了寻找更为有效的磁共振造影剂的实现方案，其造影剂制备方法包括如下步骤：获取含有氧合血红蛋白的离体血液，其中，离体血液为受检者的自体血或者与受检者的血型相同的符合临床标准异体输血条件的合格离体血液；在离体血液中通入一氧化氮，使得氧合血红蛋白所含铁的还原亚铁状态被氧化成三价铁状态，得到包含高铁血红蛋白的造影剂。本发明通过使用自体血或者与受检者的血型相同的符合临床标准异体输血条件的合格离体血液生成造影剂的方式，不仅避免了金属离子造影剂的过敏等不良反应，还在一定程度上降低了经济成本，便于大规模多样化的推广应用。