本发明公开了一种苯二氮卓类新型毒品在线固相微萃取高效液相色谱联用检测方法。本发明是以共价有机框架表面功能化固相微萃取整体柱作为固相微萃取柱，结合管内固相微萃取‑高效液相色谱在线联用系统，建立一种苯二氮卓类新型毒品在线固相微萃取高效液相色谱联用检测方法。本发明利用整体柱表面的共价有机框架与苯二氮卓类化合物之间的疏水相互作用和π‑π堆积作用，实现了实际体液样品和饮料样品中微量苯二氮卓类化合物的高效富集萃取与高灵敏在线检测。本发明方法简单，工艺巧妙，所需仪器普及度较高，易于推广，并满足苯二氮卓类新型毒品的高效检测要求。