本发明公开了一种共价有机框架（COF）表面功能化固相萃取整体柱，其是以聚（甲基丙烯酸缩水甘油酯‑co‑乙二醇二甲基丙烯酸酯）整体柱作为基质整体柱，使用碱性对苯二胺溶液作为功能化试剂对其表面进行聚对苯二胺纤维功能化；再将制备亚胺型COF的反应液注满整体柱，以聚对苯二胺纤维作为结合位点，通过席夫碱反应在整体柱表面原位生成COF微球从而制得。本发明利用聚对苯二胺纤维表面存在的大量氨基基团提高了COF的表面覆盖率，并使其可应用于固相（微）萃取实现中等极性及非极性分析对象的富集萃取，为COF引入整体柱提供了一种新途径，且工艺简便、易于操作、不需昂贵仪器、易于推广、适用分析对象范围广。