本发明公开了一种辅助动物繁殖的人工授精设备及使用方法，属于人工授精技术领域，其包括箱体，所述箱体内壁的正面通过轴承卡接有卡盘，所述卡盘内设置有冷藏组件，所述箱体上表面的右侧卡接有保温筒，所述保温筒内和冷藏组件内均设置有存放组件，所述卡盘的外表面卡接有齿盘。本发明中，注射管在旋转的过程中使精源不易发生沉淀，卡盘在旋转的过程中与四个撑杆接触，当卡盘外壁的凹面部位对应撑杆的位置时，第二弹簧的弹力对撑杆进行支撑使撑杆紧贴卡盘，卡盘继续旋转且撑杆回缩，使撑杆持续击打卡盘，相较于传统静置存放的方式，该方案避免注射管内精源发生沉淀，从而提高精液活力和受精率。