本申请属于自动化线设备配套装置技术领域，尤其涉及一种自动划线培养设备培养皿定位组件。包括培养皿托架、透明壳盖；培养皿托架包括内侧的支撑部以及外侧的连接部，透明壳盖可拆卸地扣接在培养皿托架后侧，包括：环形壳体、连接壳体、容纳壳体；本发明可以适配各类型的通用培养皿结构，以便于其能够直接转移至自动划线培养设备上进行操作，减少不必要的材料转移或者重新培养的流程，提高工作效率，同时装置在操作过程中除了安装和取出时需要打开操作外，可以在划线培养过程中保持全程封闭状态，有力保证了材料划线培养时的抗污染能力。