本发明属于生物标志物诊断技术领域，具体涉及一种同时检测细菌感染两种标志物的荧光免疫层析试纸条。以C反应蛋白和降钙素原为生物标志物，采用免疫双抗夹心法原理，利用特异性抗体的特异性结合检测生物标志物。本发明利用荧光量子点的荧光特性，先将其与不同标志物的特异性抗体Ab分别进行标记，然后将标记有不同特异性位点的标志物的特异性抗体Ab按照相应的浓度配成溶液，包被在硝酸纤维膜检测线，实现在一个反应中同时检测两种生物标志物的目的。本发明制备的试纸条具有检测简单，操作简便，成本低，自动化水平高，时间短等显著优势；同时检测CRP和PCT两种细菌感染标志物，灵敏度高。