本发明公开了一种提纯柠檬酸的萃取溶剂有机相及萃取分离柠檬酸的方法，萃取溶剂有机相包括以下原料：萃取剂、稀释剂和相调节剂，萃取分离柠檬酸的方法包括以下步骤：萃取：将用于萃取分离柠檬酸的萃取溶剂有机相与柠檬酸发酵液逆流萃取，得到负载柠檬酸有机相；反萃：将负载柠檬酸有机相与反萃剂混合，获得用于萃取分离柠檬酸的萃取溶剂有机相和柠檬酸反萃溶液；再生：将反萃后的萃取溶剂有机相经过洗涤，得到循环利用的萃取溶剂有机相，柠檬酸反萃溶液经脱色、浓缩结晶后得到柠檬酸固体产品。本发明克服了现有技术中提到的缺陷，萃取方法简单有效，能够实现环保分离提纯柠檬酸。