本发明公开了一种头孢曲松钠有关物质检测方法、头孢曲松钠二聚体及其制备方法和应用。本发明提供的头孢曲松钠有关物质的检测方法，其包含以下步骤：采用高效液相色谱法对头孢曲松钠待测品进行检测，色谱条件包括：色谱柱为C₁₈色谱柱；流动相A为甲酸‑甲酸铵缓冲液；流动相B为甲酸‑甲酸铵缓冲液和乙腈的混合液；其中所述甲酸‑甲酸铵缓冲液与所述乙腈的体积比为3/7‑1/9；所述高效液相色谱法的洗脱程序为梯度洗脱。本发明的检测方法首次实现了头孢曲松钠制品中本发明的头孢曲松钠二聚体杂质的分离鉴定，对该类杂质专属性强、灵敏度、准确度和重现性俱佳，可广泛应用于头孢曲松钠制品的质量控制。