本发明公开了一种肉牛粪尿一体化生物有机肥及其制备方法，包括以下原料，落地甘蔗黄叶、木糠和微生物A组成的发酵垫料、肉牛粪尿、微生物B，所述微生物A为氧化硫硫杆菌、硝化细菌、脱氮硫杆菌，所述微生物B为发酵乳杆菌、白地霉、假单胞杆菌，制备包括将发酵垫料制备成养殖床，微生物A与米糠、麦麸按比例加水混合制备菌种稀释物，均匀洒在养殖床上，放入肉牛养殖，经使用6‑9个月后清理发酵垫料与肉牛粪尿混合物，保持适宜温度、湿度，微生物B制备细菌液与清理后的粪尿经高位堆肥发酵制成有机肥。本发明利用微生物和降解其肉牛粪尿，提高有机肥中的总养分和有机物含量，并利用有机肥中的微生物活性，促进植物生长，环保高效，经济效益高。