本发明涉及工业催化剂技术领域，尤其是一种具有耐硫性的CO氧化催化剂及其制备方法及应用，现提出如下方案，其包括内层组分和外层组分；所述内层组分包括：载体、CuO、MnO和CeO₂，所述载体包括AC和Al₂O₃；CuO质量占载体质量3‑7％、MnO质量占载体质量3‑7％、CeO₂质量占载体质量3‑7％、AC和Al₂O₃的质量比为(1～5)：(1～9)；所述外层组分包括MoO₃‑Al₂O₃涂层，所述MoO₃‑Al₂O₃涂层中MoO₃和Al₂O₃的质量比为(0.1～0.3)：1，MoO₃‑Al₂O₃涂层的质量占载体质量3‑7％。本发明CuO与CeO₂能实现CO的快速氧化，利用AC对CO的吸附特性，进一步引入Mn作为活性助剂增强了CO的催化性能，同时涂敷MoO₃‑Al₂O₃抗硫涂层，抑制了SO₂在催化剂表面的吸附，抑制了催化活性组分的硫化，提高催化剂的耐硫特性。