本发明涉及一种重组融合蛋白、纳米组装体及其制备方法和应用，纳米组装体由至少一种重组融合蛋白和疏水性可降解聚酯及其衍生物构建而成。所述重组融合蛋白包括单链抗体片段、连接肽和具有疏水区域的白蛋白，其中单链抗体片段具有竞争性结合靶点、抑制信号通路、激活信号通路、靶向抗原的作用中的至少一种。本发明还公布了单抗抗体片段‑白蛋白重组融合蛋白的制备方法以及纳米组装体的构建方法。本发明所述纳米组装体提供了一种全新的单特异性、双特异性或多特异性抗体的构筑方法，该纳米组装体可用于肿瘤、自身免疫疾病等疾病的治疗。