本发明提供了一种用于生物大分子纯化的PES中空纤维膜及其制备方法与应用，该PES中空纤维膜包括主体，主体的内表面上具有若干个狭缝形的第一孔洞，第一孔洞的孔径宽度平均值为60nm‑450nm，第一孔洞在内表面上的孔洞面积率为5‑30％，第一孔洞的孔径宽度方向与中空纤维膜的周向一致；从而使得该膜具有高截留效率，以切向流过滤的方式纯化各种生物大分子，其截流分子量为100K‑750K；在从内表面至外表面的膜厚度方向上，主体的平均孔径先增大再减小；主体包括分离层和支撑层，支撑层包括第一大孔区，第一大孔区的平均孔径至少为第一孔洞的孔径宽度平均值的4倍以上，第一大孔区的存在使得膜具有高通量，同时能够提供缓冲作用，降低透膜阻力，膜组件的能量转化率更高。