本发明公开了一种抗心衰中药质量标志物发现方法，该方法包括：一、抗心衰中药提取液的制备；二、心肌线粒体提取；三、心肌线粒体膜色谱柱的制备；四、心肌线粒体膜二维液相色谱分析系统的建立；五、心肌线粒体膜二维液相色谱分析系统的选择性考察；六、抗心衰中药质量标志物的发现；本发明还公开了一种四逆汤质量标志物群。本发明以心肌线粒体膜为靶标筛选得到抗心衰中药质量标志物，具有快速，高通量，筛选结果准确度高的优点；本发明获得四逆汤中的抗心衰中药质量标志物，实现了四逆汤基于药效成分的质量评价，破解了四逆汤制剂质量的参差不齐导致用药疗效预期不明确及四逆汤质量评价与其药效不关联的问题。