本发明公开了一种lncRNA Peln1促进iPSC定向分化为胰岛β样细胞的方法，方法为：第一步、利用染色质lncRNA原位逆转录测序CLIST‑seq方法筛选与多能基因Oct4启动子结合的多能性退出相关lncRNA，并验证其在各组织中的表达；第二步、构建lncRNA Peln1过表达质粒并通过慢病毒包装后感染目的细胞；第三步、过表达lncRNAPeln1对三胚层分化的影响：诱导iPSC分化，设三个实验组；第四步、过表达lncRNAPeln1对iPSC‑分化胰岛细胞效率的影响。有益效果：本发明采用过表达lncRNAPeln1的方式，提高了iPSC向内胚层分化的比例；本发明采用过表达lncRNAPeln1的方式,提高了体外定向诱导iPSC向胰岛β样细胞分化的效率，能够提高约38％。为优化或建立iPSC向胰岛β样细胞高效、定向分化方案奠定理论基础，推动诱导干细胞产品治疗糖尿病的临床转化。