本发明公开了一种二羟丙茶碱原料药及其制剂中有关物质的检测方法，解决了现有中国药典2020中二羟丙茶碱有关物质分析方法只针对杂质B进行检测，经实验确认该方法杂质B和杂质C不能有效分离，且主峰理论塔板数低于5000，检测数据不可靠，无法有效的对二羟丙茶碱质量进行控制技术问题。所述检测方法采用高效液相色谱法进行测定，具体包括下述检测步骤：S1、制备供试品溶液；S2、制备自身对照溶液；S3、制备混合对照溶液；S4、制备系统适用性溶液；S5、液相色谱检测。本发明提供的二羟丙茶碱原料药及其制剂中有关物质的检测方法，适用于二羟丙茶碱原料药及其制剂的有关物质分析，实现了杂质之间以及杂质与主峰之间的有限分离。