本发明公开了一种基于小分子探针的多聚物二抗的制备方法及二抗抗体，本发明方法中用化学方法修饰水溶性高分子骨架，使过氧化氢酶通过化学键结合到高分子上形成多聚物酶结构，以衣康酸为母体的小分子探针与抗体结合后，用生物化学偶联方法将多聚物酶与小分子‑抗体混合孵育，形成多聚物酶标记的二抗抗体。上述制备方法可制备多聚物二抗抗体以用于免疫组化对实体肿瘤的辅助诊断。该探针母体为衣康酸小分子，可实现抗体与酶的特异性高效聚合反应，使得更多的酶通过偶联结构链接到单分子的抗体上，形成溶解度好、位阻小的复合物结构，在免疫组化实验中可提高信号强度。本发明制备方法安全环保，操作简便，不需要苛刻的条件，且合成产率和纯度高。