本发明涉及一种手性肿瘤纳米疫苗及其应用，涉及手性纳米肿瘤佐剂技术领域。本发明所述的手性肿瘤纳米疫苗，包括手性金纳米粒子、免疫刺激剂、油剂和抗原。本发明所述的手性肿瘤纳米疫苗能激活树突细胞，促进抗原提呈，进而活化CD8⁺T淋巴细胞以及自然杀伤细胞，并增强自然杀伤细胞以及CD8⁺T淋巴细胞的杀伤能力，以达到预防和治疗肿瘤的目的。本发明所述的手性肿瘤纳米疫苗具有优异的免疫激活效果以及抗原特异性抗肿瘤的治疗和预防效果，能增强免疫动物针对肿瘤抗原的细胞免疫应答，其制备过程简易，效果良好。