本发明公开了一种酚化木质素基O/W型Pickering乳液及其制备方法和应用，属于微纳米功能乳液的制备及应用领域。本发明利用酚类物质在低温条件下对木质素进行酚化，得到酚化木质素；然后通过碱溶酸析法将所述酚化木质素制备成酚化木质素颗粒分散液；再以所述酚化木质素颗粒分散液为水相，有机溶剂为油相，按配比将水相和油相混合，均质，得到酚化木质素基O/W型Pickering乳液。本发明采用酚类物质改性木质素，通过增加酚羟基含量来提升木质素的抗紫外能力，使酚化木质素基颗粒制备的Pickering乳液对光敏性药物的保护作用更强。并且，本发明采用酚类物质改性木质素使木质素亲水性增加，从而增加了木质素颗粒在水油界面的稳定性，延缓了Pickering乳液的破乳时间，达到缓释药物的效果。