本发明涉及一种大鼠细小病毒RPV‑1特异性VP2基因重组抗原、合成方法及试剂盒，大鼠细小病毒RPV‑1特异性VP2基因重组抗原氨基酸序列为SEQ ID NO：1。本发明的大鼠细小病毒RPV‑1特异性VP2基因重组抗原，选用大鼠细小病毒VP2蛋白上的特异性序列段201‑450aa片段，并制备成抗原，同时建立了间接ELISA方法，实现低成本、高特异性且更安全的ELISA检测。本发明的大鼠细小病毒RPV‑1特异性基因重组抗原，能用于大鼠细小病毒的间接ELISA试剂盒或大鼠细小病毒的免疫学试剂盒，能对大鼠细小病毒RPV‑1进行单独检测，能避免与KRV和H‑1阳性血清的交叉反应，检测的准确性高，且与病毒分离培养和观察鉴定的检测方法相比，检测效率高，检测操作简便，检测成本低。