本发明属于生物医药领域，涉及一种经光热剂修饰的细菌、其制备方法及其应用。该细菌是一种组合光热剂表面修饰和遗传表达的工程化细菌，是在细胞内表达黑色素且在细胞外表面由至少一种光热剂修饰的细菌。该至少一种光热剂包括第一光热剂和/或第二光热剂，其中第一光热剂为多巴胺，第二光热剂包括选自光热染料中的一种或多种；优选地，第二光热剂为近红外荧光染料，更优选地，吲哚菁绿。该经光热剂修饰的细菌在激光照射之后具有稳定的三重光热升温效果，在肿瘤部位具有特异性定植能力，且渗透能力强，能够实现均匀分布和持久的滞留效应。