本发明公开了一种用于大鼠椎间盘源性腰痛实验的穿刺装置，包括大鼠固定基座、穿刺定位辅助模块和穿刺针组件，所述穿刺定位辅助模块包括传动机构总成、腰椎长度测量组件和腱膜识别总成，所述传动机构总成的内侧设有腰椎长度测量组件，所述腰椎长度测量组件的左端设有腱膜识别总成，所述腰椎长度测量组件的外侧设有辅助穿刺组件，所述腰椎长度测量组件的前端与后端内侧均设有磁感应嵌块，所述辅助穿刺组件的内侧设有腰椎节定位组件，本发明通过辅助穿刺组件在腰椎长度测量组件上的滑动，对穿刺针组件进行导向，方便穿刺针组件对大鼠椎间盘进行穿刺，并通过启动相邻组交接处的磁感应嵌块，实现辅助穿刺组件在大鼠椎间盘关节处的快速定位。